以下是梅毒水平旋转仪(RPR振荡器)的标准操作规程(SOP)综合整理,结合多个来源的技术要求和操作规范:
一、目的
规范梅毒水平旋转仪的操作流程,确保梅毒血清学检测(如RPR、TRUST、VDRL试验)的准确性和重复性,避免因操作不当导致假阳性或假阴性结果。
二、适用范围
适用于非特异性梅毒抗体检测中样本与试剂的混匀及抗原-抗体反应,需配合RPR/TRUST/VDRL试剂盒使用。
三、操作前准备
1. 仪器检查
◦ 确认电源线、插头完好,旋转平台清洁无残留,仪器水平放置无倾斜。
◦ 检查转速(100±2转/分)和计时功能(8分钟±10秒)是否正常,必要时用转速计校准。
2. 试剂与样本准备
◦ 试剂(如RPR抗原)需从冰箱取出平衡至室温(20-25℃),避免冷凝水影响活性。
◦ 血清样本需离心(3000 rpm,10分钟)去除纤维蛋白或沉淀,确保无溶血或脂血。
◦ 准备阳性对照、阴性对照及质控样本。
四、操作流程
1. 加样与抗原反应
◦ 使用移液器吸取50μL血清样本及对照品,均匀加入反应板圆圈内,避免气泡或溢出。
◦ 垂直滴加1滴(约17μL)RPR抗原试剂,避免混匀(部分试验需混匀,以说明书为准)。
2. 仪器参数设置
◦ 根据检测方法设定参数:
▪ RPR/TRUST:100±2转/分,8分钟。
▪ VDRL:180±2转/分,4分钟。
3. 启动运行
◦ 将反应板平稳置于旋转平台中央,启动仪器,观察初始10秒确保无液体溅出或偏移。
◦ 运行期间禁止打开防护罩或移动仪器。
五、结果判读
1. 观察标准
◦ 阳性:明显黑色凝集块(RPR)或片状凝集(VDRL)。
◦ 阴性:均匀细小颗粒或无凝集。
◦ 弱阳性需稀释复检或结合TPPA等特异性试验确认。
2. 记录要求
◦ 立即在光线充足处观察(5分钟内完成),记录凝集程度及对照结果。
六、注意事项
1. 质量控制
◦ 每批次实验需运行阴/阳性对照,定期参与室间质评。
2. 生物**
◦ 佩戴手套和护目镜,废弃卡片按医疗废物处理。
3. 设备维护
◦ 每日清洁旋转平台(75%酒精),每月检查电机传动带和转轴润滑。
七、常见问题处理
• 假阴性:检查转速不足、试剂失效或样本稀释过度。
• 液体溅出:确认反应板放置平稳,避免超载。
• 仪器异响:停机检查传动部件或异物卡滞。
八、维护与校准
• 定期清洁托盘(耐腐蚀材质),校准转速和计时模块。
• 长时间不用需断电,存放于干燥洁净环境。
此SOP综合了设备操作、结果判读及质控要点,具体参数需结合试剂说明书和实验室要求调整。